摘要:目的:观察皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中PTEN的动态调控作用,并探讨PTEN在慢性难愈合创面修复过程中的作用。方法:90只SD大鼠随机分为MEBO组、贝复济组、慢创组、对照组、空白组5组,每组18只,建立体表皮肤溃疡模型,并分别于造模后第3天,第7天,第14天取创面组织,采用Western blotting和Real-Time PCR技术检测PTEN蛋白以及基因表达水平。结果:除空白组外,其余各组大鼠创面组织中PTEN表达均随时间递增而变化,差异有统计学意义(P<0.01);除14 d的各组大鼠创面组织中PTEN表达差异无统计学意义外,其余各时间点组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:MEBT/MEBO能通过降低创面中PTEN蛋白和mRNA的表达水平,从而加速创面愈合。这可能是MEBT/MEBO促进慢性难愈合创面修复的机制之一。
摘要:目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面的修复作用,并从同源性磷酸酶张力蛋白(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)通路影响慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotease 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotease 9,MMP-9)表达,为MEBT/MEBO临床推广提供可靠理论依据。方法:(1)参照付小兵教授等人的全层皮肤缺损法和沈道修教授等人的改良塑料环肉芽肿定量法的基础上进行精进改良,建立慢性难愈合创面模型。SPF级Wistar大鼠,按随机数字表法分为5个组,分别为美宝组(30只)、贝复新组(30只)、模型组(30只)、急性组(30只)、空白组(30只)。于造模后的第3、7、14d,观察各组大鼠的创面情况及愈合率,并通过HE和Masson染色观察创面组织形态学变化情况;(2)采用ELISA法检测各组大鼠慢性难愈合创面肉芽组织中TNF-α和IL-6蛋白表达变化,观察各组大鼠创面组织中炎症反应变化情况;(3)采用Western Blot法检测PTEN和p-AKT蛋白表达变化情况,观察各组大鼠创面组织受到干预后对PTEN/AKT信号通路的调控影响;(4)采用ELISA法、Western Blot法和RT-PCR法检测各组大鼠慢性难愈合创面肉芽组织中MMP-2和MMP-9蛋白表达变化情况,以及MMP-2 m RNA和MMP-9 m RNA基因转录情况,观察各组大鼠创面组织受到干预后对MMP-2和MMP-9表达变化的影响。结果:(1)各组大鼠创面的疗效观察:急性组的创面愈合情况最优,且明显优于模型组;而美宝组和贝复新组创面愈合情况也优于模型组(P<0.05);HE染色及Masson染色结果:急性组、美宝组和贝复新组的形态学观察均较模型组好。(2)各组大鼠创面组织中TNF-α和IL-6蛋白表达的变化:(1)急性组、美宝组和贝复新组的标本组织匀浆中TNF-α蛋白表达呈现出先升高后降低的趋势,模型组则呈现出递增趋势;与模型组相比,造...
摘要:目的:利用壮药南酸枣树皮水煎剂干预慢性难愈合创面模型大鼠,探究其疗效机制。方法:采用全层皮肤缺损法改进慢性难愈合创面大鼠模型,将40只大鼠随机分为空白对照组、模型组、湿润烧伤膏组、南酸枣树皮组,空白对照组和模型组外敷生理盐水,湿润烧伤膏组采用皮肤再生医疗技术,南酸枣树皮组外敷南酸枣树皮水煎剂。12 d后取全层皮肤组织进行超微病理检测,利用RT-PCR技术观察PTEN、VEGF mRNA的变化情况。结果:经12 d药物干预后,湿润烧伤膏组、南酸枣树皮组皮肤细胞器的形态结构基本恢复。第12天湿润烧伤膏组、南酸枣树皮组分别与第1天相比,均出现PTEN mRNA水平降低、VEGF mRNA水平增高,差异具有统计学意义(P<0.05);第12天湿润烧伤膏组、南酸枣树皮组分别与模型组相比,均出现PTEN mRNA水平降低、VEGF mRNA水平增高,差异具有统计学意义(P<0.05);而湿润烧伤膏组与南酸枣树皮组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:壮药南酸枣树皮能显著改善慢性难愈合创面导致的细胞结构异常,调控PTEN介导的信号通路传导效应,改善损伤病灶,促进创面组织修复。
摘要:目的:慢性难愈合创面是临床中常见的病种之一,但在治疗上缺乏有效的手段干预,越来越多的研究将慢性难愈合创面的治疗靶向转变为促进创面血管新生,探究MEBT/MEBO在促进血管新生过程的作用机制,为临床推广和应用MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面提供理论依据和参考价值;方法:应用付小兵及沈道修相结合的造模方法,分组为空白组、急性创面组、慢性难愈合创面组、贝复济组、MEBT/MEBO组,采用Image J软件、Western Blot、RT-PCR等方法,从宏观到微观观察PTEN-Akt-VEGF信号通路在各组中的动态变化;结果:MEBT/MEBO能够通过调控PTEN-Akt-VEGF信号通路,促进VEGF表达及其mRNA的转录,促进创面血管新生,提高创面愈合率。结论:(1)血管新生是创面修复的一个重要过程,上调VEGF的表达可加速血管新生,并以此促进创面愈合;(2)MEBT/MEBO在慢性难愈合创面的治疗中是安全、高效的治疗手段,可通过调控PTEN-Akt-VEGF信号通路,促进创面血管新生,达到创面愈合的效果。