摘要：目的:评价湿润烧伤膏和全蝎软膏联用治疗糖尿病皮肤溃疡创面愈合的效果并探讨其作用机制。方法:选择Wistar大鼠建立糖尿病皮肤溃疡模型,采用随机数字表法将其分为对照组、模型组、全蝎软膏组、湿润烧伤膏组和联用组,以连续饲喂高脂饲料、腹腔注射链脲佐菌素(STZ)及皮肤损伤法制备糖尿病皮肤溃疡大鼠模型。造模后,分别在创伤处进行药物干预处理,空白组和模型组用PBS处理并计算创面愈合率;采用免疫组化、创面组织超微病理结构观察给药后3 d、7 d、10 d和14 d的创面肉芽组织,western-blot检测Smad4蛋白的表达。结果:糖尿病皮肤溃疡模型组的大鼠体重、血糖与正常组相比有统计学差异,成模率为95.45%;经14 d连续治疗后,各治疗组创面愈合率均高于模型组(P<0.05),联用组创面愈合率与对照组水平接近。免疫组化染色结果显示与模型组相比,经药物干预后的创面组织内AGEs和RAGE的表达水平均明显下调(P<0.05);电镜观察结果表明联用湿润烧伤膏和全蝎软膏能够促进胞内细胞器恢复正常水平,其改善效果较单独药物干预组效果更显著;Western-blot检测结果表明各治疗组创面组织内Smad 4蛋白水平较模型组显著降低,但联用组中Smad4蛋白水平下调更显著(P<0.05)。结论:联合应用湿润烧伤膏和全蝎软膏能够有效促进大鼠糖尿病性皮肤溃疡创面的愈合,可能与调控组织中糖基化终末产物AGEs-RAGE信号通路及下调Smad4蛋白表达水平,抑制炎症反应有关。

摘要：目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)干预糖尿病性溃疡创面愈合的作用机制。方法于2015年6月选取145只12周龄的SPF级健康雄性SD大鼠,采用随机数字表法将其分为空白组(35只)和糖尿病模型组(110只),糖尿病模型组采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,8周后选取空白组30只及糖尿病模型组成模大鼠90只,糖尿病模型组成模大鼠再采用随机数字表法分为模型组、MEBO组及贝复济组,每组30只,4组均制备溃疡模型。成功后MEBO组予MEBO纱条、贝复济组予重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液浸透纱条、空白组及模型组予0.9%氯化钠溶液纱条局部换药处理,1次/d。分别于创面干预后第3、6、12天,每次随机选取10只大鼠,观察创面愈合速率;取相同位点创面组织,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测晚期糖基化终末产物(AGEs)、核因子κB(NF-κB)水平,荧光PCR技术检测AGE受体(RAGE)mRNA表达水平,HE染色观察创面组织炎性细胞浸润、成纤维细胞及血管生成情况。结果造模8周后,糖尿病模型组体质量低于空白组,血糖水平高于空白组(P<0.01)。空白组、模型组、MEBO组和贝复济组第3、6、12天创面愈合速率比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中模型组、MEBO组、贝复济组创面愈合速率低于空白组,MEBO组、贝复济组创面愈合速率高于模型组;第6、12天时,贝复济组创面愈合速率低于MEBO组(P<0.05)。空白组、模型组、MEBO组和贝复济组第3、6、12天创面组织AGEs水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中模型组、MEBO组、贝复济组创面组织AGEs水平高于空白组,MEBO组、贝复济组创面组织AGEs水平低于模型组(P<0.05)。空白组、模型组、MEBO组和贝复济组第3、6、12天创面组织NF-κB水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中第6、12天时,模型组创面组织NF-κB水平高于空白组,MEBO组创面组织NF-κB水平低于模型组;第12天时,贝复济组创面组织NF-κB水平高于空白组、低于模型组(P<0.05)。空白组、模型组、MEBO组、贝复济组第3、6、12天创面组织RAGE mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中第6、12天时,模型组、贝复济组创面组织RAGE mRNA表达水平高于空白组,MEBO组创面组织RAGE mRNA表达水平低于...

摘要：目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)干预糖尿病性溃疡创面组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)m RNA表达及超微结构的作用机制。方法于2015年6月选取145只12周龄的雄性健康SPF级SD大鼠,采用随机数字表法将其分为空白组(35只)和糖尿病模型组(110只),糖尿病模型组采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法制备糖尿病大鼠模型,8周后选取空白组30只和糖尿病模型组成模大鼠90只,采用随机数字表法将糖尿病模型组成模大鼠分为模型亚组、贝复济亚组及MEBO亚组,各30只,均制备糖尿病性溃疡创面模型。模型制备成功后,空白组及模型亚组给予0.9%氯化钠溶液纱条、贝复济亚组给予贝复济溶液纱条、MEBO亚组给予MEBO纱条局部换药处理,1次/d,共12 d。各组分别于创面干预治疗后第3、6、12天,每次随机选取10只大鼠,取相同位点创面组织,应用荧光聚合酶链式反应(PCR)技术检测ICAM-1、VCAM-1 m RNA表达水平,电镜观察创面组织超微病理结构。结果模型亚组第3天创面组织ICAM-1 m RNA表达水平低于空白组,第6、12天创面组织ICAM-1 m RNA表达水平均高于空白组(P<0.05);贝复济亚组第12天创面组织ICAM-1 m RNA表达水平低于模型亚组(P<0.05);MEBO亚组第3天创面组织ICAM-1 m RNA表达水平高于模型亚组,第6、12天创面组织ICAM-1m RNA表达水平均低于模型亚组(P<0.05)。模型亚组第3天创面组织VCAM-1 m RNA表达水平低于空白组,第6、12天创面组织VCAM-1 m RNA表达水平均高于空白组(P<0.05);贝复济亚组、MEBO亚组第3天创面组织VCAM-1m RNA表达水平均高于模型亚组,第6、12天创面组织VCAM-1 m RNA表达水平均低于模型亚组(P<0.05)。病理结果显示:干预后第6、12天,与模型亚组比较,贝复济亚组和MEBO亚组细胞结构均逐步改善,能促进各细胞器形态恢复正常。结论 MEBO能够调控糖尿病性溃疡创面组织中糖基化终末产物(AGEs)-AGEs受体(RAGE)信号通路下游因子ICAM-1、VCAM-1的表达,改善细胞超微结构,促进糖尿病性溃疡创面愈合。

摘要：目的 基于网络药理学探究糖尿病足（Diabetic foot, DF）应用湿润烧伤膏（Moist exposed burn ointment, MEBO）治疗的作用机制。方法 采用中药系统药理学分析系统（TCMSP）收集整合MEBO的化学成分及有效成分靶点信息，借助UniProt数据库统一处理靶点基因名称；通过人类基因综合数据库（Gene Cards）分析DF的相关靶点基因，利用Venny 2.1软件分析MEBO活性成分靶点与DF靶点的相关性，获取潜在靶点。利用STRING网站分析交集靶点，随后利用Cytoscape 3.10.0软件构建PPI网络图，找出关键靶点基因。结果 MEBO的主要成分包含黄连、黄柏、黄芩、黄麻苷A等；关键作用靶点为表皮生长因子受体（EGFP）、白细胞介素-1B(IL-1B)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子（TNF）等；关键作用通路为VEGF、AGE-RAGE、HIF-1等。结论 经研究MEBO的有效化学成分能够从多靶点、多通路治疗DF，具有促进上皮细胞生长、调节细胞生长与胶原纤维分泌、降低血糖与镇痛作用、保护创面与促进愈合以及减少瘢痕形成等优势。