摘要:目的:探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)及其产品湿润烧伤膏(MEBO)对SD大鼠慢性难愈合皮肤创面组织p38MAPK信号通路表达的影响。 方法:健康成年SPF级SD雄性大鼠80只,12周龄,体重220g~250g,适应性喂养1w后,按随机数字表法选出20只大鼠作为空白组,空白组大鼠建立全层皮肤缺损开放性创面模型后不予其他处理。其余60只大鼠制备成慢性难愈合创面模型,然后按处理办法随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组20只。各组创面制备后立即用药治疗。各组首次换药前以1/5000呋喃西林液清洁创面,换2次药。观察各组大鼠创面愈合时间,以及在12h、3d、7d、14d共4个时...
摘要:目的 观察湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、趋化因子配体1(CXCL1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)蛋白表达的影响。方法 将72只SD大鼠随机分为急性皮损组、慢性创面组、贝复新组、美宝组各18只,除急性皮损组外,其余组皮下注射氢化可的松建立慢性难愈合创面,注射完成后用生理盐水清理创面,贝复新组创面敷贝复新凝胶,美宝组创面敷美宝烧伤膏,均每日上下午各换药1次。观察各组大鼠伤后第3,7,14天创面情况并取创面肉芽组织,Masson染色观察创面中胶原纤维生成情况,ELISA法检测肉芽组织中MMP-2含量,免疫组化法检测创面组织中CXCL1、GM-CSF蛋白表达情况。结果 美宝组大鼠创面愈合速度快于慢性创面组和贝复新组。Masson染色显示各组创面组织中胶原纤维含量随伤后时间的延长逐渐增加;伤后第3,7天,美宝组胶原纤维含量均明显高于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05);伤后第14天,各组胶原纤维含量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。创面组织中MMP-2含量,贝复新组随伤后时间延长而增加(P<0.05),美宝组随伤后时间延长而减少(P<0.05);伤后第3天,美宝组创面组织中MMP-2含量明显高于慢性创面组(P<0.05);伤后第7天,美宝组和贝复新组创面组织中MMP-2含量下降但与慢性创面组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);伤后第14天,美宝组创面组织中MMP-2含量明显低于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05)。贝复新组伤后创面组织中CXCL1表达平均光密度随伤后时间延长降低,伤后第14天明显低于伤后第3天(P<0.05);伤后第3,7,14天创面组织中GM-CSF表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。美宝组伤后第3,7,14天创面组织中CXCL1表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05);伤后第7,14天创面组织中GM-CSF表达平均光密度均明显低于伤后第3天(P均<0.05),且伤后第14天明显低于伤后第7天(P<0.05)。慢性创面组、贝复新组、美宝组伤后第3,7,14天创面组织中CXCL1表达平均光密度和伤后第7天创面组织中GM-CSF表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。伤后第3天,美宝组创面组织中GM-CSF表达平均光密度与慢性创面组比较差异无统计学意义...
摘要:目的通过动态观察大鼠慢性难愈合皮肤创面肉芽组织中p38、MK2蛋白及基因表达变化,从p38信号通路角度探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合皮肤创面的可能修复机制。方法实验一:以40只SD大鼠为研究对象,随机分为MEBO组、贝复济组、模型组、空白组,每组各10只,依据文献复制了大鼠体表皮肤溃疡模型。造模后第二天用药,观察创面愈合时间及愈合率;实验二:SD大鼠80只,随机分为4个组,每组20只,同实验一造模方法,造模后第3d,7d,14d各组随机处死5只大鼠,取相同部位皮肤溃疡创面肉芽组织,采用Western blotting和Real-Time PCR技术检测p38、MK2蛋白及其mRNA水平表达差异。结果(1)Western blotting检测结果:①在整个创面愈合过程中,纵向比较,P38、MK2总蛋白表达量在同个时相点各组差异无统计学意义(P>0.05),横向比较,在造模后第3天表达最高,其次逐渐下降;②在创伤早期,模型组、MEBO组、贝复济组创面组织中p-p38、p-MK2表达差异无统计学意义(P>0.05);在造模后第7天,各组间的差异开始明显,空白组、MEBO组、贝复济组表达量开始显著下降,模型组下降趋势不明显,各组两两比较差异有统计学意义(P<0.05);造模后第14天,相比其他三组,模型组表达量仍处于较高水平(P<0.05),MEBO组和贝复济组差异无统计学意义(P>0.05);(2)RT-PCR检测结果:①在整个实验过程中,与空白组相比,MEBO组、贝复济组、模型组的P38 mRNA、MK2 mRNA表达量在第3天时最多,随后持续下降;②造模后第3天,各组差异无统计学意义(P>0.05);造模后第7天,MEBO组、贝复济组的表达量下降趋势明显,两组之间有明显统计学差异(P<0.05);造模后第14天,MEBO组、贝复济组的表达量持续下降,两组之间无统计学差异(P>0.05),但与模型组相比均有差异(P<0.05),模型组仍处于高表达。结论(1)MEBO能明显缩短大鼠慢性难愈合创面的愈合时间,下调p38和MK2磷酸化及其mRNA表达水平。(2)慢性难愈合创面难迟缓愈合与p-p38和p-MK2高水平表达有关,MEBO能促进慢性难愈合创面的作用机制之一可能是通过下调p38MAPK信号通路中p38和MK2磷酸化水平,阻断部分信号转导,抑制p38MAPK信号通路被过度激活的状态,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合。
摘要:目的:本研究通过对烧伤湿性医疗技术(MEBT)及产品湿润膏(MEBO)促进慢性难愈性皮肤溃疡创面愈合的观察及新生肉芽组织中bFGF、VEGF表达的影响进行研究,探讨MEBO促进慢性难愈性皮肤溃疡创面愈合的作用及可能机制。 方法:健康成年SD雄性大鼠60只,简单随机抽样随机数字表法分为MEBO组、凡士林对照组和空白对照组,每组20只。参照文献制成SD大鼠体表慢性难愈性溃疡创面模型,造模后第2天开始用药。观察用药后各组创面炎症反应、创面愈合等情况,检测各组创面肉芽情况并进行对照观察。伤后第3、6、12、18天取创面组织,在光学显微镜下观察创面生长情况,用免疫组化...