摘要：目的探讨皮肤原位再生医疗技术(MEBT/MEBO)治疗大鼠糖尿病足溃疡创面的效果及对转化生长因子(TGF)-β1、磷酸化smad3(P-smad3)、β-catenin mRNA表达的影响。方法选取50只SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、MEBT/MEBO组、贝复济组,各10只。比较四组大鼠治疗8 d的创面愈合率、平均创面愈合时间及TGF-β1蛋白、P-smad3蛋白、β-catenin mRNA的表达。结果正常对照组、MEBT/MEBO组、贝复济组的平均创面愈合时间都低于模型对照组,模型对照组治疗8 d的创面愈合率低于正常对照组、MEBT/MEBO组、贝复济组(P<0. 05); MEBT/MEBO组的平均创面愈合时间低于贝复济组,但高于正常对照组(P<0. 05)。模型对照组的TGF-β1、P-smad3蛋白表达及β-catenin mRNA表达均低于正常对照组、MEBT/MEBO组、贝复济组(P<0. 05),MEBT/MEBO组的TGF-β1、P-smad3蛋白表达低于正常对照组(P<0. 05)。MEBT/MEBO组的β-catenin mRNA表达高于贝复济组(P<0. 05)。结论 MEBT/MEBO可增强TGF-β1、P-smad3蛋白及β-catenin mRNA的表达,这可能是MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡的作用机制。

摘要：随着发育生物学、分子生物学等生命科学的飞速发展和组织工程、干细胞工程等技术的进步，人们对烧（创）伤修复、组织再生的认识更加深刻。烧（创）伤治疗技术有了更大的提高。但烧（创）伤修复是一个极其复杂的生物学过程，完美的皮肤修复不仅包括表皮和真皮的完美再生（如表皮无色素沉淀，真皮无瘢痕），还包括表皮附属器的再生，血管和外周神经的修复等。烧伤湿性医疗技术是一种较新的烧（创）伤治疗方法，也是卫生部首批十年百项成果推广项目。有临床实验表明：湿润烧伤膏能加速伤口愈合，减少瘢痕的发生率和降低创面感染率等效果。虽然烧伤湿性医疗技术在临床上已得到了一定的推广，但其作用机理、特别是细胞水平和分子水平的研究甚少。本实验的目的是：在细胞水平研究了湿润烧伤膏治疗的患者在修复过程中烧伤部位的病理学变化和胶原的变化；在分子水平研究了Ⅰ型胶原（type 1 collagen）、基质金属蛋白酶1（MMP-1）、整合素α3（integrin α3）、整合素β1（integrin β1）、转化生长因子β1（TGF-β1）的时空变化，同时也研究了MMP-1、整合素α3、整合素β1与Smad3的关系并探讨了其功能。为深入研究这些因子特别是Smad3在烧伤修复中的作用提供了一定的理论基础和实验依据。首先，我们通过HE染色观察了湿润烧伤膏治疗的患者在修复过程中烧伤部位的病理学变化。在烧伤后第二十四小时，伤口表面未发现血凝块，炎症反应较轻；在烧伤后第四天，凝固的团块状坏死组织较大，炎症细胞浸润，组织水肿，第七天；伤口表面有较厚的渗出层，渗出层下凝固的团块状坏死组织变小，团块状坏死组织周围是炎症细胞，这一时期炎症反应强烈，坏死组织下有增生的肉芽组织；在烧伤后第十天，新生表皮出现，部分表皮脚下延，真皮中团块状坏死组织消失，大量炎症细胞浸润，皮肤附属器增生。烧伤后第十四天，新生血管数量达峰值，炎症反应增强。烧伤后第二十一天，炎症反应减轻，成纤维细胞增多，新生血管减少。烧伤后第二十八天，表皮增厚并出现角质化。真皮出现乳头层，炎症反应继续减轻，成熟的成纤维细胞（mature fibroblasts）增多。愈后皮肤的表皮比正常表皮厚，但完全分化，结构清晰并有汗腺导管，基底...

摘要：目的:观察应用MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡创面的临床疗效;运用Western-blot及常规病理技术探讨MEBT/MEBO促进大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的机制。方法:(1)临床研究:将符合糖尿病足溃疡诊断的患者60例,随机分为观察组和对照组,每组30例。观察组外敷美宝湿润烧伤膏,对照组外敷贝复济。分别记录两组患者治疗第7天、第14天、第28天创面愈合率,观察治疗42天后两组患者临床疗效及两组患者创面愈合时间,评价其疗效、安全性。(2)动物实验:将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)与糖尿病造模组(80只)。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠糖尿病模型,选取60只造模成功大鼠随机分为MEBO组、贝复济组、模型组(各20只)。各组大鼠均建立足溃疡模型,空白对照组、模型组外敷生理盐水,MEBO组外敷美宝湿润烧伤膏,贝复济组外敷贝复济。用药第5天、14天,各组分别处死10只大鼠,利用光镜观察溃疡创面组织形态学结构,Western-blot法测定TGF-β1、Smad3、P-smad3蛋白的表达量。结果:(1)临床研究:治疗第14天、第28天,观察组与对照组对比,患者创面愈合率提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。在经过42天治疗后,观察组患者临床疗效优于对照组(P<0.05)。观察组患者创面愈合时间比对照组患者创面愈合时间短(P<0.05)。MEBO组未见明显毒副作用或不良反应。(2)动物实验:连续换药第5天,四组大鼠Smad3蛋白表达量相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白的表达量均显著提高(P<0.01);与贝复济组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白的表达量略高(P>0.05)。第14天,四组大鼠Smad3蛋白表达量相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组相比,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白表达量均显著降低(P<0.01);且与贝复济组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白表达量略高,但差异无统计学意义(P>0.05)。用药第5天,MEBO组、贝复济组及空白对照组溃疡创面肉芽组织中成纤维细胞、毛细血管新生情况优于模型组,炎症细胞较模型组少,但空白对照组成纤维细胞排列紊乱;用药第14天,MEBO组、贝复济组创面组织成纤维细胞及胶原纤维排列致密成形,可见皮肤附属器,空白对照...

摘要：目的运用Western-blot技术探讨MEBT/MEBO促进大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的机制。方法将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)与糖尿病造模组(80只)。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠糖尿病模型,选取60只造模成功大鼠随机分为MEBO组、贝复济组、模型组(各20只)。各组大鼠均建立足溃疡模型,空白对照组、模型组外敷生理盐水,MEBO组外敷美宝湿润烧伤膏,贝复济组外敷贝复济。用药第5天、14天,各组分别处死10只大鼠,利用Western-blot法测定TGF-β1、Smad3、P-smad3蛋白的表达量。结果连续换药第5天,四组大鼠Smad3蛋白表达量相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白的表达量均显著提高(P<0.01);与贝复济组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白的表达量略高,但差异无统计学意义(P>0.05)。第14天,四组大鼠Smad3蛋白表达量相比较,差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组相比,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白表达量均显著降低(P<0.01);且与贝复济组相比较,MEBO组TGF-β1、P-smad3蛋白表达量略高(P>0.05)。结论 MEBT/MEBO可能通过动态调节TGF-β1、P-smad3蛋白的表达,从而起到促进糖尿病足溃疡愈合的作用,同时在一定程度上减少瘢痕形成。