摘要：目的 探究皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物(mTORC)信号通路对慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)、基质金属蛋白酶-8 (MMP-8)表达水平的影响:方法 选取SPF级雄性Wistar大鼠60只适应性饲养7 d后,按照随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、rb-bFGF组、MEBO组,每组12只,其中空白组大鼠只做备皮处理,对照组大鼠于脊柱两侧建立急性创面模型,模型组、rb-bF-GF组、MEBO组大鼠于脊柱两侧建立慢性难愈合创面模型。模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理,rb-bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF)换药处理,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)换药处理,对比观察各组大鼠干预第3、7、14天时创面愈合率以及皮肤/创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及相应mRNA的表达水平。结果 干预第7、14天,对照组、rb-bFGF组、MEBO组大鼠创面愈合率均明显高于模型组(P均<0.05)。干预第3、7、14天,对照组、rb-bFGF组、MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MMP-8 mRNA表达水平均呈先升高后降低的趋势,而模型组呈持续升高的趋势;干预第3、7天,rb-bFGF组和MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MM P-8 mRNA表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),而干预第14天,rb-bFGF组和MEBO组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8、p-mTORC蛋白及MMP-3、MMP-8mRNA表达水平均明显低于模型组(P均<0.05),且干预第3、7天rb-bFGF组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8蛋白表达水平均明显低于MEBO组(P均<0.05),而干预第3、7、14天两组大鼠创面组织中MMP-3、MMP-8 mRNA表达水平均无明显差异(P均>0.05);干预第3、7、14天,各组大鼠创面组织中mTORC mRNA表达水平均无明显变化(P均>0.05)。结论 MEBT/MEBO可通过调控mTORC信号通路中MMP-3和MMP-8的表达水平促进慢性难愈合创面愈合。

摘要：目的:用超微病理技术及RT-PCR技术检测观察湿润暴露疗法（Moist Exposed Burn Therapy,MEBT）/湿润烧伤膏（Moist Exposed Bum Ointiment,MEBO）对大鼠慢性难愈合创面的干预作用,研究其促进溃疡创面愈合的机制。方法:80只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、湿润烧伤膏组、康复新液组,每组20,只。建立全层皮肤难愈合创面模型后,空白对照组不做处理,模型组外敷生理盐水,湿润烧伤膏组外敷美宝湿润烧伤膏（MEBO）,康复新液组外喷康复新液。用药12天,利用透射电镜观察皮肤创面细胞超微结构,RT-PCR技术测定MAPKK、c-myc mRNA的表达量。结果:用药第3、6、12天,湿润烧伤膏组与康复新液组细胞结构逐步改善,各细胞器形态结构逐渐恢复至正常水平。与模型组相比,湿润烧伤膏组MAPKK和c-myc mRNA表达量均显著增高,差异均具有统计学意义（P<0.001）;而与康复新液组相比,湿润烧伤膏组MAPKK和c-myc的mRNA表达量则无明显差别(PMAPKK=0.996;Pc-myc=0.989)。结论:MEBT/MEBO能够改善细胞超微病理结构,提高MAPKK、c-myc mRNA的表达量,进而促进大鼠慢性难愈合创面恢复。

摘要：目的:1.观察皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进体表慢性难愈合创面(简称“慢创”)愈合的药效作用。2.观察MEBT/MEBO对体表慢性难愈合创面组织的苏木精-伊红染色(HE)染色病理形态学的改善作用;并观察全层皮肤愈合过程中,其真皮再生模式及与表皮层、基底膜层再生的关系。3.探究MEBT/MEBO干预PI3K/Akt/mTOR信号通路调控创面蛋白质合成促进体表慢性难愈合创面愈合的修复机制。4.探讨MEBT/MEBO作用IGF-1/PI3K/Akt信号通路调控创面血管生成促进慢创修复的机制。方法:1.将160只雄性SD大鼠随机分为空白组24只、对照组(急性全层皮肤缺损组)34只和体表慢性难愈合创面组102只,慢性难愈合创面组(全层皮肤缺损+注射醋酸氢化可的松)造模成功后再随机分为模型组34只、贝复新组(阳性对照组)34只和MEBT/MEBO组34只。并同时于第3、7、14 d取创面组织。各组分别干预治疗后,观察创面愈合情况,记录统计创面愈合时间;于干预治疗后第3 d、7 d和14 d固定焦距拍照创面计算愈合率。HE染色法观察病理学改变、PAS染色法观察创面基底膜层的生长情况。提取第3、7、14 d创面组织总RNA和蛋白,Real-time PCR和Western blot法检测PI3K、Akt(S473)、mTOR(Ser2448)、p70 S6K(Thr389)、4E BP1(Thr37/46)的mRNA和蛋白转录及表达水平。2.145只雄性SD大鼠,随机分为空白组21只、对照组31只和慢创组93只,慢创组造模成功后再随机分为模型组、贝复新组和MEBT/MEBO组各31只,于干预治疗后第3 d、7 d和14 d取创面组织。碱性水浸泡法扫描电子显微镜技术(SEM)观察创面组织愈合过程中真皮全层再生过程。提取第3 d、7 d和14 d创面组织,分离上清液,ELISA法检测IGF-1含量;提取创面组织总RNA和蛋白,Real-time PCR和Western blot法检测PI3K、Akt(S473)、eNOS(S1177)、VEGFR2的mRNA和蛋白表达水平。结果:1.与模型组比较,MEBT/MEBO组显著缩短大鼠创面愈合时间和提高创面愈合率(P<0.01)。2.造模及干预治疗14 d后,MEBT/...

摘要：目的采用RT-PCR检测方法观察皮肤原位再生复原技术(Moist Exposed BurnTreatment/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的干预作用,研究其促进溃疡创面愈合的机制。方法将100只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)和糖尿病造模组(80只),糖尿病造模组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ),成功制备糖尿病大鼠模型64只,从中随机选取60只,并随机分为湿润烧伤膏(MEBO)组(20只)、贝复济组(20只)和模型组(20只)。造模成功后次日开始用药,各组大鼠创面给予相应的药物治疗,并记录创面愈合时间;用药6 d后,采用RT-PCR法观察记录创面肉芽组织中β-catenin mRNA和Smad3 mRNA的表达量。结果 (1)4组大鼠创面平均愈合时间对比,空白对照组愈合时间最短;MEBO组、贝复济组、模型组3组大鼠创面平均愈合时间对比,MEBO组愈合时间最短。(2)用药后第6天,模型组大鼠创面肉芽组织中β-catenin mRNA的表达显著低于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠创面肉芽组织中Smad3 mRNA的表达显著高于空白对照组、MEBO组、贝复济组(P<0.01),而MEBO组与贝复济组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MEBT/MEBO可抑制Smad3 mRNA、增强β-catenin mRNA在实验性糖尿病足溃疡大鼠创面修复中的表达,缩短创面愈合时间,促进糖尿病足溃疡创面的愈合。