摘要：目的:1.观察皮肤再生医疗技术(Moist exposed burn therapy/Moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进体表慢性难愈合创面(简称“慢创”)愈合的药效作用。2.观察MEBT/MEBO对体表慢性难愈合创面组织的苏木精-伊红染色(HE)染色病理形态学的改善作用;并观察全层皮肤愈合过程中,其真皮再生模式及与表皮层、基底膜层再生的关系。3.探究MEBT/MEBO干预PI3K/Akt/mTOR信号通路调控创面蛋白质合成促进体表慢性难愈合创面愈合的修复机制。4.探讨MEBT/MEBO作用IGF-1/PI3K/Akt信号通路调控创面血管生成促进慢创修复的机制。方法:1.将160只雄性SD大鼠随机分为空白组24只、对照组(急性全层皮肤缺损组)34只和体表慢性难愈合创面组102只,慢性难愈合创面组(全层皮肤缺损+注射醋酸氢化可的松)造模成功后再随机分为模型组34只、贝复新组(阳性对照组)34只和MEBT/MEBO组34只。并同时于第3、7、14 d取创面组织。各组分别干预治疗后,观察创面愈合情况,记录统计创面愈合时间;于干预治疗后第3 d、7 d和14 d固定焦距拍照创面计算愈合率。HE染色法观察病理学改变、PAS染色法观察创面基底膜层的生长情况。提取第3、7、14 d创面组织总RNA和蛋白,Real-time PCR和Western blot法检测PI3K、Akt(S473)、mTOR(Ser2448)、p70 S6K(Thr389)、4E BP1(Thr37/46)的mRNA和蛋白转录及表达水平。2.145只雄性SD大鼠,随机分为空白组21只、对照组31只和慢创组93只,慢创组造模成功后再随机分为模型组、贝复新组和MEBT/MEBO组各31只,于干预治疗后第3 d、7 d和14 d取创面组织。碱性水浸泡法扫描电子显微镜技术(SEM)观察创面组织愈合过程中真皮全层再生过程。提取第3 d、7 d和14 d创面组织,分离上清液,ELISA法检测IGF-1含量;提取创面组织总RNA和蛋白,Real-time PCR和Western blot法检测PI3K、Akt(S473)、eNOS(S1177)、VEGFR2的mRNA和蛋白表达水平。结果:1.与模型组比较,MEBT/MEBO组显著缩短大鼠创面愈合时间和提高创面愈合率(P<0.01)。2.造模及干预治疗14 d后,MEBT/...

摘要：目的:观察皮肤再生医疗技术(Moist Exposed Burn Therapy/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对肛瘘术后创面愈合的临床疗效以及对大鼠创面组织中BMP-7表达的影响。方法:(1)将2018年5月-2019年9月在我院行手术治疗的肛瘘患者90名,随机分成对照组30例,MEBO组30例,贝复济组30例,MEBO组以皮肤再生医疗技术进行干预治疗,贝复济组以贝复济干预治疗,对照组术后创面以生理盐水进行干预,对比三组术后第3、7、14、21天创面分泌物、肉芽组织以及肛门疼痛情况;对比三组术后第2、14、21天两组创面愈合情况。(2)按照随机数表法将54只健康成年SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组(18只)、MEBO组(18只)和贝复济组(18只),模型建立后,对照组创面局部涂生理盐水、MEBO组以皮肤再生医疗技术进行干预治疗,贝复济组以贝复济干预治疗,并分别于治疗后第3、7、14天取创面组织进行检测。采用Western blot检测各组大鼠创面组织中BMP-7蛋白的表达水平,采用油红O染色观察创面组织中脂肪细胞的生成情况,采用苏木精-伊红染色观察创面愈合情况,采用Masson染色观察创面组织纤维化情况。结果:(1)三组创面分泌物对比在术后第3天对比差异无统计学意义(P>0.05),在术后第7天贝复济组最少,在术后第14、21天MEBO组和贝复济组创面分泌物均少于对照(P<0.05);(2)在术后第7、14、21天,MEBO组和贝复济组的肉芽组织均优于対照组(P<0.05);(3)三组肛门局部疼痛评分对比在术后第3天差异无统计学意义(P>0.05),在术后第7、14、21天对比,MEBO组和贝复济组疼痛程度低于对照组(P<0.05);(4)术后第14天、第21天,MEBO组和贝复济组创面愈合率高于对照组(P<0.05)。(5)在治疗的第3天、第7天、第14天,创面组织中BMP-7表达水平组内比较差异具有统计学意义(P<0.05),BMP-7表达水平逐渐升高(第3天<第7天<第14天),组间对比:MEBO组与对照组对比差异有统计学意义(P<0.05),贝复济组与对照组对比差异有统计学意义(P<0.05),MEBO组与贝复济组对比差异无统计学意义(P>0.05)。(6)随着治疗时间延长,脂肪细胞生成数逐渐增多(P<0.05),其中MEBO组、贝复济组脂肪细胞生成数较对...

摘要：目的 探讨糖尿病大鼠难愈合创面再上皮化的病理变化及湿润暴露疗法/湿润烧伤膏（MEBT/MEBO）对其干预的机制。方法 80只Wistar雄性大鼠，随机取18只作为急性创面组，其余大鼠建立糖尿病创面模型。将糖尿病创面造模成功的54只大鼠随机分为糖尿病创面组、MEBT/MEBO组、贝复新组，每组18只。各组大鼠换药前均以呋喃西林液清洁创面，急性创面组和糖尿病创面组均外敷2层生理盐水纱布，MEBT/MEBO组外敷2层MEBO纱条（0.2 g/cm2）,贝复新组外敷2层贝复新浸透纱布（60 IU/cm2）,均每日换药2次。分别于造模后第3,7,14天，统计各组创面愈合率，HE染色和Masson染色观察创面病理变化，免疫荧光观察创面组织中层黏连蛋白3（LAMA3）蛋白表达情况，RT-PCR法检测创面组织中LAMA3、整合素α3（ITGA3）、E盒结合锌指蛋白1（ZEB1）mRNA表达量。结果 造模后第7,14天，糖尿病创面组创面愈合率均明显低于其他组（P均<0.05）,MEBT/MEBO组和贝复新组比较差异无统计学意义（P均>0.05）。HE染色和Masson染色显示：造模后第3天，各组创面均处于炎症浸润状态；造模后第7天，糖尿病创面组创面处于炎症浸润状态，胶原纤维稀疏，边缘表皮增厚且无明显迁移，其他组炎症浸润均减轻，表皮增厚并明显迁移；造模后第14天，糖尿病创面组创面仍有炎症浸润，表皮再上皮化不全，其他组创面表皮覆盖且再上皮化明显。造模后第3,7,14天，糖尿病创面组创面组织中LAMA3蛋白阳性表达光密度值和LAMA3、ITGA3 mRNA表达量均明显低于其他组（P均<0.05）,ZEB1 mRNA表达量均明显高于其他组（P均<0.05）,MEBT/MEBO组创面组织中LAMA3蛋白阳性表达光密度值和LAMA3、ITGA3、ZEB1mRNA表达量与贝复新组比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 糖尿病大鼠难愈合创面再上皮化延迟，而MEBT/MEBO能促进创面再上皮化修复，其机制可能与上调再上皮化区LAMA3、ITGA3表达和下调ZEB1表达有关。

摘要：目的:探讨糖尿病难愈合创面再上皮化的ZEB1、LAMA3、ITGA3表达机制及皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)是否对此机制存在影响。方法:将12周龄雄性Wistar大鼠随机分为急性创面组(血糖正常)、糖尿病创面组。制备1型糖尿病大鼠后将之分为:MEBT/MEBO组、贝复新组、无药物干预的模型组。在各组大鼠背部制备2个直径为30mm全层皮肤缺损创面,分别使用不同干预措施处理创面。通过统计各组大鼠3、7、14天创面愈合面积,初步观察各组创面愈合效果;HE染色和Masson染色镜下观察创面愈合过程中的肉芽组织新生情况、胶原纤维形成状态和角质形成细胞再上皮化效果;通过免疫荧光化学观察各组不同时间段(第3、7、14天)的创面中ZEB1、LAMA3蛋白的分布与表达情况;Real-Time PCR检测创面中ZEB1、LAMA3、ITGA3的基因表达水平。结果:(1)创面愈合率:实验第3天,模型组与其余三组比较尚无差异(P>0.05);实验第7、14天糖尿病模型组大鼠出现伤口延迟愈合,与急性创面组比较有明显差异(P<0.001),而糖尿病大鼠创面经MEBT/MEBO、贝复新干预治疗后,其愈合率优于模型组(P<0.05或P<0.001),而MEBT/MEBO组与贝复新组的愈合率无差异(P>0.05)。(2)病理染色、表皮迁移观察:实验干预第3天各组创面均呈现炎症浸润状态,皮肤结构层次缺损,创面边缘表皮的迁移情况无明显差异(P>0.05);第7天急性创面组有大量肉芽组织、胶原纤维、小血管新生,轻微炎症,创面边缘的表皮角质形成细胞增生并向创面中心迁移,而模型组少量肉芽组织和血管,大量坏死细胞碎片,炎症浸润,其再上皮化迁移较急性创面组缓慢(P<0.001),MEBT/MEBO组与贝复新组炎症浸润、细胞坏死较轻,存在肉芽组织、胶原纤维和血管新生,再上皮化迁移均优于模型组(P<0.05或P<0.01);第14天急性创面组大部分创面的已被迁移的表皮覆盖,肉芽组织丰厚、胶原纤维分布有序,并存在新生的皮脂腺、毛囊、血管、神经纤维束等,贝复新组、MEBT/MEBO组接近完成再上皮化,肉芽组织丰富,胶原纤维整齐均匀,皮肤附件生成,而模型组仍存在少量炎症浸润,未完成再上皮化覆盖,其再上皮化均明显慢于其他组(P<0.01或P<0.05)。(3)免疫荧光:ZEB1蛋白在真皮细胞核中表达,与急性创面组比较,第3天的模型组ZEB1蛋白表达较高(P<0.0...