摘要：目的:观察皮肤再生医疗技术(Moist Exposed Burn Therapy/Moist Exposed Burn Ointment,MEBT/MEBO)对肛瘘术后创面愈合的临床疗效以及对大鼠创面组织中BMP-7表达的影响。方法:(1)将2018年5月-2019年9月在我院行手术治疗的肛瘘患者90名,随机分成对照组30例,MEBO组30例,贝复济组30例,MEBO组以皮肤再生医疗技术进行干预治疗,贝复济组以贝复济干预治疗,对照组术后创面以生理盐水进行干预,对比三组术后第3、7、14、21天创面分泌物、肉芽组织以及肛门疼痛情况;对比三组术后第2、14、21天两组创面愈合情况。(2)按照随机数表法将54只健康成年SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组(18只)、MEBO组(18只)和贝复济组(18只),模型建立后,对照组创面局部涂生理盐水、MEBO组以皮肤再生医疗技术进行干预治疗,贝复济组以贝复济干预治疗,并分别于治疗后第3、7、14天取创面组织进行检测。采用Western blot检测各组大鼠创面组织中BMP-7蛋白的表达水平,采用油红O染色观察创面组织中脂肪细胞的生成情况,采用苏木精-伊红染色观察创面愈合情况,采用Masson染色观察创面组织纤维化情况。结果:(1)三组创面分泌物对比在术后第3天对比差异无统计学意义(P>0.05),在术后第7天贝复济组最少,在术后第14、21天MEBO组和贝复济组创面分泌物均少于对照(P<0.05);(2)在术后第7、14、21天,MEBO组和贝复济组的肉芽组织均优于対照组(P<0.05);(3)三组肛门局部疼痛评分对比在术后第3天差异无统计学意义(P>0.05),在术后第7、14、21天对比,MEBO组和贝复济组疼痛程度低于对照组(P<0.05);(4)术后第14天、第21天,MEBO组和贝复济组创面愈合率高于对照组(P<0.05)。(5)在治疗的第3天、第7天、第14天,创面组织中BMP-7表达水平组内比较差异具有统计学意义(P<0.05),BMP-7表达水平逐渐升高(第3天<第7天<第14天),组间对比:MEBO组与对照组对比差异有统计学意义(P<0.05),贝复济组与对照组对比差异有统计学意义(P<0.05),MEBO组与贝复济组对比差异无统计学意义(P>0.05)。(6)随着治疗时间延长,脂肪细胞生成数逐渐增多(P<0.05),其中MEBO组、贝复济组脂肪细胞生成数较对...

摘要：目的:建立糖尿病溃疡创面大鼠模型,以细胞自噬和PI3K-Akt-mTOR信号通路为研究切入点,探讨皮肤再生医疗技术(湿润暴露疗法,Moist exposed burn therapy,MEBT/湿润烧伤膏,Moist exposed burn ointment,MEBO)促进糖尿病溃疡创面修复的机制,为临床推广应用MEBT/MEBO治疗糖尿病溃疡创面提供理论依据。方法:将80只健康雄性wistar大鼠随机分成糖尿病溃疡创面组60只、对照组20只。糖尿病溃疡创面组先进行适应性喂养1周,再予高脂饲料喂养4周,禁食16小时,再腹腔注射链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)45mg/kg,以空腹血糖≥16.7mmol/L为糖尿病造模成功。1周后在大鼠背部建立直径约为2.5cm×2.5cm的全层皮肤切除模型,创面深度要求到达筋膜层,创面表面涂抹金黄色葡萄球菌悬浮液,造成糖尿病溃疡创面模型,再将其随机分为三组:MEBO组、康复新组和模型组,每组20只,分别采用MEBO、康复新液、生理盐水外敷进行创面处理。对照组大鼠在背部行全层皮肤切除,创面深度及大小与糖尿病溃疡创面组相同,但不予注射STZ,其创面也不涂抹金黄色葡萄球菌悬浮液。造模成功后各组动态观察创面的愈合情况,测量、计算各组大鼠的创面愈合率,并分别于第1天、第5天、第11天、第18天、第25天共5个时相点各组随机取4只大鼠,采集造模区创面组织后处死。将采集到的组织样品分别行常规病理技术观察创面组织形态学结构、电镜观察自噬体变化、Western blot检测PI3K、Akt、mTOR蛋白表达水平、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)分析PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达情况。结果:1.创面愈合情况:对照组的创面修复最好,愈合时间最短;MEBO组、康复新组的创面修复情况显著优于模型组。创面愈合率:各组大鼠的创面愈合率均随着各时相点的增加呈逐渐升高趋势,在第5天,创面愈合率:对照组>康复新组>MEBO组>模型组,差异有统计学意义(P<0.05);第11天、第18天、第25天,创面愈合率:对照组>MEBO组>康复新组>模型组,差异有统计学意义(P<0.05),其中在第18天和第25天,MEBO组与康复新组之间对比差异均无统计学意义(P=0.76、0.23)。2.创面病理变化:第5天,MEBO组、康复新组及对照组的...

摘要：目的:探讨糖尿病难愈合创面再上皮化的ZEB1、LAMA3、ITGA3表达机制及皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)是否对此机制存在影响。方法:将12周龄雄性Wistar大鼠随机分为急性创面组(血糖正常)、糖尿病创面组。制备1型糖尿病大鼠后将之分为:MEBT/MEBO组、贝复新组、无药物干预的模型组。在各组大鼠背部制备2个直径为30mm全层皮肤缺损创面,分别使用不同干预措施处理创面。通过统计各组大鼠3、7、14天创面愈合面积,初步观察各组创面愈合效果;HE染色和Masson染色镜下观察创面愈合过程中的肉芽组织新生情况、胶原纤维形成状态和角质形成细胞再上皮化效果;通过免疫荧光化学观察各组不同时间段(第3、7、14天)的创面中ZEB1、LAMA3蛋白的分布与表达情况;Real-Time PCR检测创面中ZEB1、LAMA3、ITGA3的基因表达水平。结果:(1)创面愈合率:实验第3天,模型组与其余三组比较尚无差异(P>0.05);实验第7、14天糖尿病模型组大鼠出现伤口延迟愈合,与急性创面组比较有明显差异(P<0.001),而糖尿病大鼠创面经MEBT/MEBO、贝复新干预治疗后,其愈合率优于模型组(P<0.05或P<0.001),而MEBT/MEBO组与贝复新组的愈合率无差异(P>0.05)。(2)病理染色、表皮迁移观察:实验干预第3天各组创面均呈现炎症浸润状态,皮肤结构层次缺损,创面边缘表皮的迁移情况无明显差异(P>0.05);第7天急性创面组有大量肉芽组织、胶原纤维、小血管新生,轻微炎症,创面边缘的表皮角质形成细胞增生并向创面中心迁移,而模型组少量肉芽组织和血管,大量坏死细胞碎片,炎症浸润,其再上皮化迁移较急性创面组缓慢(P<0.001),MEBT/MEBO组与贝复新组炎症浸润、细胞坏死较轻,存在肉芽组织、胶原纤维和血管新生,再上皮化迁移均优于模型组(P<0.05或P<0.01);第14天急性创面组大部分创面的已被迁移的表皮覆盖,肉芽组织丰厚、胶原纤维分布有序,并存在新生的皮脂腺、毛囊、血管、神经纤维束等,贝复新组、MEBT/MEBO组接近完成再上皮化,肉芽组织丰富,胶原纤维整齐均匀,皮肤附件生成,而模型组仍存在少量炎症浸润,未完成再上皮化覆盖,其再上皮化均明显慢于其他组(P<0.01或P<0.05)。(3)免疫荧光:ZEB1蛋白在真皮细胞核中表达,与急性创面组比较,第3天的模型组ZEB1蛋白表达较高(P<0.0...

摘要：目的观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)表达的影响,探讨MEBT/MEBO促进糖尿病创面愈合的可能机制。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠90只,随机分为对照组、模型组和MEBO组,每组30只,其中对照组大鼠建立常规创面模型,模型组和MEBO组大鼠建立糖尿病创面模型。模型建立后,对照组及模型组大鼠创面予以生理盐水纱布外敷治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱外敷治疗。分别于治疗第1、11、18天采用Western blotting法检测ULK1蛋白及qRT-PCR技术检测ULK1 mRNA的表达水平,并对比观察3组大鼠创面愈合情况。结果(1)治疗第1天,3组大鼠创面均淤血水肿,无肉芽组织形成;治疗第11天,对照组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成,模型组大鼠创面高度水肿,无肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成;治疗第18天,对照组大鼠创面完全愈合,模型组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成。(2)治疗第11、18天,3组大鼠创面愈合率对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。(3)治疗第1天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组=模型组,对照组与MEBO组及对照组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第11天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第18天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组=MEBO组<模型组,对照组与模型组及MEBO组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可有效促进糖尿病大鼠创面愈合,提高创面组织中ULK1表达水平,诱导细胞自噬可能是其作用机制之一。