摘要:目的:观察MEBT/MEBO在糖尿病足溃疡大鼠创面愈合过程中的作用,探讨其促进创面愈合的作用机理。 方法:健康雄性SPF级SD大鼠100只,体重(200~250)g。常规饲养一周后,随机分为:空白对照组(20只)、糖尿病造模组(80只)。第一步,糖尿病大鼠模型制备:80只糖尿病造模组大鼠尾静脉注射链脲佐菌素STZ,制备糖尿病大鼠模型,7d后测血糖,血糖大于16.7mmol/L为糖尿病模型制备成功标准,成功64只,16只未达到糖尿病血糖值,从64只糖尿病模型制备成功的大鼠中随机选取60只,分为3组,每组20只:MEBT/MEBO组、贝复济组、模型组,以做进一步处理。第二步,全层皮肤缺损开放性创面模型制...
摘要:目的用免疫组化法及超微病理技术探讨烧伤湿性医疗技术(Moist Exposed Burn Therapy,MEBT)及其配套产品湿润烧伤膏(Moist Exposed Burn Ointment,MEBO)促进大鼠糖尿病足溃疡创面愈合的机制。方法将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(20只)与糖尿病造模组(80只)。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠糖尿病模型,选取60只造模成功的大鼠并随机分为MEBO组、贝复济组、模型组(每组20只)。4组大鼠均建立足溃疡模型,空白对照组、模型组外敷生理盐水,MEBO组外敷湿润烧伤膏,贝复济组外敷贝复济。治疗第5天和第14天,各组分别处死10只大鼠,利用电镜观察溃疡创面肉芽组织细胞的超微结构,并用免疫组化技术测定TGF-β1、Smad3蛋白的表达量,对比各组观察及测定结果。结果治疗第5天和第14天,MEBO组与贝复济组溃疡创面肉芽组织细胞的超微结构逐步改善,细胞内各细胞器的形态结构逐渐恢复,MEBO组、贝复济组肉芽组织细胞的超微结构情况明显优于模型组。连续换药第5天,MEBO组TGF-β1、Smad3蛋白的表达量均明显高于模型组(P<0.001),且MEBO组、空白对照组、贝复济组3组相比,TGF-β1、Smad3蛋白的表达量无明显差异;第14天,MEB0组TGF-β1、Smad3蛋白的表达量均明显低于空白对照组(P<0.001),且MEBO组、贝复济组、模型组3组相比,TGF-β1、Smad3蛋白的表达量无明显差异。结论 MEBT/MEBO能改善细胞的超微结构,并通过动态调节TGF-β1、Smad3蛋白的表达量,促进糖尿病足溃疡创面的愈合,同时可在一定程度上减少瘢痕形成。
摘要:目的:观察MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡的临床疗效;探索MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡的部分机制。方法:将符合糖尿病足溃疡诊断的患者60例,随机分为实验组和对照组,每组30例。实验组运用MEBT/MEBO换药治疗,对照组贝复济(bFGF)换药治疗,14天为1个疗程,分别记录两组患者第1疗程结束时、第2疗程结束时的创面愈合情况,观察治疗2个疗程后两组患者临床疗效及两组患者创面愈合率,评价其疗效、安全性。将参与临床研究的两组患者分别于0d、14d、28d三个时相点取创面组织,通过酶联反应吸附测定法检测创面组织中VEGF和EGF的含量表达。结果:在经过28天治疗后,实验组患者溃疡面积、深度、治疗前后局部症状体征积分均优于对照组(P<0.05)。实验组临床疗效优于对照组(P<0.05)。实验组未见明显毒副作用或不良反应。治疗第14d、28d,实验组VEGF以及EGF含量均高于对照组(P<0.05)。结论:(1)MEBT/MEBO在治疗糖尿病足溃疡中临床效果明显,具有缩短愈合时间,改善创面局部症状的作用,且对患者无明显不良反应。(2)MEBT/MEBO的使用能够明显提升患者糖尿病足创面组织中VEGF、EGF两种细胞因子的含量,加快创面的修复过程。
摘要:目的:探讨糖尿病难愈合创面再上皮化的ZEB1、LAMA3、ITGA3表达机制及皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)是否对此机制存在影响。方法:将12周龄雄性Wistar大鼠随机分为急性创面组(血糖正常)、糖尿病创面组。制备1型糖尿病大鼠后将之分为:MEBT/MEBO组、贝复新组、无药物干预的模型组。在各组大鼠背部制备2个直径为30mm全层皮肤缺损创面,分别使用不同干预措施处理创面。通过统计各组大鼠3、7、14天创面愈合面积,初步观察各组创面愈合效果;HE染色和Masson染色镜下观察创面愈合过程中的肉芽组织新生情况、胶原纤维形成状态和角质形成细胞再上皮化效果;通过免疫荧光化学观察各组不同时间段(第3、7、14天)的创面中ZEB1、LAMA3蛋白的分布与表达情况;Real-Time PCR检测创面中ZEB1、LAMA3、ITGA3的基因表达水平。结果:(1)创面愈合率:实验第3天,模型组与其余三组比较尚无差异(P>0.05);实验第7、14天糖尿病模型组大鼠出现伤口延迟愈合,与急性创面组比较有明显差异(P<0.001),而糖尿病大鼠创面经MEBT/MEBO、贝复新干预治疗后,其愈合率优于模型组(P<0.05或P<0.001),而MEBT/MEBO组与贝复新组的愈合率无差异(P>0.05)。(2)病理染色、表皮迁移观察:实验干预第3天各组创面均呈现炎症浸润状态,皮肤结构层次缺损,创面边缘表皮的迁移情况无明显差异(P>0.05);第7天急性创面组有大量肉芽组织、胶原纤维、小血管新生,轻微炎症,创面边缘的表皮角质形成细胞增生并向创面中心迁移,而模型组少量肉芽组织和血管,大量坏死细胞碎片,炎症浸润,其再上皮化迁移较急性创面组缓慢(P<0.001),MEBT/MEBO组与贝复新组炎症浸润、细胞坏死较轻,存在肉芽组织、胶原纤维和血管新生,再上皮化迁移均优于模型组(P<0.05或P<0.01);第14天急性创面组大部分创面的已被迁移的表皮覆盖,肉芽组织丰厚、胶原纤维分布有序,并存在新生的皮脂腺、毛囊、血管、神经纤维束等,贝复新组、MEBT/MEBO组接近完成再上皮化,肉芽组织丰富,胶原纤维整齐均匀,皮肤附件生成,而模型组仍存在少量炎症浸润,未完成再上皮化覆盖,其再上皮化均明显慢于其他组(P<0.01或P<0.05)。(3)免疫荧光:ZEB1蛋白在真皮细胞核中表达,与急性创面组比较,第3天的模型组ZEB1蛋白表达较高(P<0.0...