摘要:目的:从p38MAPK信号通路探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合皮肤创面的修复机制。方法:(1)实验一:SPF级10~12周,体重在220g250g之间,SD雄性大鼠40只,一周适应性喂养,按照随机原则抽取10只大鼠作为空白组,空白组大鼠仅作皮肤全层切除,不再进行药物干预。剩余30只大鼠注射醋酸氢化可的松形成慢性难愈合创面模型,随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组10只。造模后第二天用药治疗。换药前各组均以1/5000呋喃西林溶液清洁创面,每天换药2次。在造模后第3天、第7天、第14天观察创面情况、测量并计算各组创面愈合率,观察计算创面愈合时间。(2)实验二:同实验一要求的大鼠80只,按照随机原则抽取20只大鼠作为空白组,同实验一的造模方法,剩余60只大鼠随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组20只。造模后第二天用药治疗。换药方法及次数同实验一。在造模后第3天、第7天、第14天各组随机处死5只,取皮肤创面组织,一部分用10%福尔马林固定以作病理切片,剩余部分立即放于液氮罐中,稍后迅速转入-80℃超低温冰箱。待标本收集完毕做后续的Western blotting、RT-PCR、ELISA方法检测。结果:(1)创面大体情况:空白组创面恢复最好,MEBO组、贝复济组情况显著优于模型组。(2)创面愈合时间:空白组愈合时间最短(13.40±0.74d),与模型组相比有显著差异(P<0.01),模型组所需时间最长(22.19±2.09d),与各组相比有显著差异(F=141.900,P<0.01),MEBO组愈合时间与贝复济组无显著差异(P>0.05)。(3)创面愈合率:在第3d,7d,14d,空白组愈合率与模型组相比有显著差异(P<0.05);在第7d、第14d,MEBO组、贝复济组与模型组愈合率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);MEBO组与贝复济组比较,在第3d、14d,差异无统计学意义(P>0.05),但在第7d相比,有显著差异(P<0.05)。(4)Western blotting:(1)在整个创面愈合过程中,实验二各组大鼠创面肉芽组织中p38、MK2的含量呈逐渐递减趋势(P<0.01),造模后第3天、第7天、第14天各时相点各组大鼠创面肉芽p38、MK2表达均无差异(P>0.05);(2)在创伤早期,模型组、MEBO组、贝复济组创面组织中p-p38、p-...
摘要:目的:探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)及其产品湿润烧伤膏(MEBO)对SD大鼠慢性难愈合皮肤创面组织p38MAPK信号通路表达的影响。 方法:健康成年SPF级SD雄性大鼠80只,12周龄,体重220g~250g,适应性喂养1w后,按随机数字表法选出20只大鼠作为空白组,空白组大鼠建立全层皮肤缺损开放性创面模型后不予其他处理。其余60只大鼠制备成慢性难愈合创面模型,然后按处理办法随机分为模型组、MEBO组和贝复济组,每组20只。各组创面制备后立即用药治疗。各组首次换药前以1/5000呋喃西林液清洁创面,换2次药。观察各组大鼠创面愈合时间,以及在12h、3d、7d、14d共4个时...
摘要:目的:探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)及产品湿润烧伤膏(MEBO)促进大鼠慢性难愈合皮肤创面组织愈合的机制。方法:建立慢性难愈合创面模型,观察MEBT/MEBO对大鼠慢性难愈合皮肤创面组织p38MAPK信号通路表达的影响。结果:①创面愈合大体情况:观察造模后创面肉芽组织生长情况,发现MEBO组、贝复济组大鼠创面内芽组织生长情况明显好于模型组,MEBO组和贝复济组大鼠创面较红润,可见散在的肉芽颗粒生长,模型组大鼠创面较苍白,生长缓慢。②创面愈合时间:MEBO组大鼠的皮肤溃疡创面愈合时间为16.28±1.19d,短于贝复济组17.52±1.20d(P<0.05),明显短于模型组27.10±2.90d(P<0.05),差异有统计学意义。③ATF2和p38蛋白的表达:模型组ATF2和p38蛋白的表达明显低于MEBO组、贝复济组(P<0.01),MEBO组在第14天高于模型组(P<0.05)。结论:MEBO能促进大鼠慢性难愈合皮肤创面愈合的速度和质量,功效优于模型组。MEBO能影响p38MAPK信号通路相关蛋白中ATF2和p38的表达,从而激活p38MAPK信号通路,影响和调控细胞效应,进而促进细胞因子的产生以及随后的细胞增殖,血管再生和基质修复,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合。
摘要:目的通过动态观察大鼠慢性难愈合皮肤创面肉芽组织中p38、MK2蛋白及基因表达变化,从p38信号通路角度探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合皮肤创面的可能修复机制。方法实验一:以40只SD大鼠为研究对象,随机分为MEBO组、贝复济组、模型组、空白组,每组各10只,依据文献复制了大鼠体表皮肤溃疡模型。造模后第二天用药,观察创面愈合时间及愈合率;实验二:SD大鼠80只,随机分为4个组,每组20只,同实验一造模方法,造模后第3d,7d,14d各组随机处死5只大鼠,取相同部位皮肤溃疡创面肉芽组织,采用Western blotting和Real-Time PCR技术检测p38、MK2蛋白及其mRNA水平表达差异。结果(1)Western blotting检测结果:①在整个创面愈合过程中,纵向比较,P38、MK2总蛋白表达量在同个时相点各组差异无统计学意义(P>0.05),横向比较,在造模后第3天表达最高,其次逐渐下降;②在创伤早期,模型组、MEBO组、贝复济组创面组织中p-p38、p-MK2表达差异无统计学意义(P>0.05);在造模后第7天,各组间的差异开始明显,空白组、MEBO组、贝复济组表达量开始显著下降,模型组下降趋势不明显,各组两两比较差异有统计学意义(P<0.05);造模后第14天,相比其他三组,模型组表达量仍处于较高水平(P<0.05),MEBO组和贝复济组差异无统计学意义(P>0.05);(2)RT-PCR检测结果:①在整个实验过程中,与空白组相比,MEBO组、贝复济组、模型组的P38 mRNA、MK2 mRNA表达量在第3天时最多,随后持续下降;②造模后第3天,各组差异无统计学意义(P>0.05);造模后第7天,MEBO组、贝复济组的表达量下降趋势明显,两组之间有明显统计学差异(P<0.05);造模后第14天,MEBO组、贝复济组的表达量持续下降,两组之间无统计学差异(P>0.05),但与模型组相比均有差异(P<0.05),模型组仍处于高表达。结论(1)MEBO能明显缩短大鼠慢性难愈合创面的愈合时间,下调p38和MK2磷酸化及其mRNA表达水平。(2)慢性难愈合创面难迟缓愈合与p-p38和p-MK2高水平表达有关,MEBO能促进慢性难愈合创面的作用机制之一可能是通过下调p38MAPK信号通路中p38和MK2磷酸化水平,阻断部分信号转导,抑制p38MAPK信号通路被过度激活的状态,从而促进大鼠慢性难愈合创面的愈合。